“肌钙蛋白I自身抗体为何对肌钙蛋白I检测造成负性或假阴性影响.......”
《肌钙蛋白I检测标准化那点事》提到肌钙蛋白I不能标准化,其中重要的原因是肌钙蛋白I干扰因素比较多,除了蛋白降解,蛋白磷酸化,肝素的影响,还有一个重要的干扰因素就是肌钙蛋白I自身抗体的影响。本篇文章主要说明肌钙蛋白I自身抗体对肌钙蛋白I检测结果的影响。
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什么是肌钙蛋白I自身抗体
cTnI是由个氨基酸组成的多肽链,大部分氨基酸具有抗原性,其中氨基端和羧基端的抗原性最强。由于位于心肌细胞胞浆的cTnI在机体生长发育过程中归属“遮蔽性抗原”,故释放入血循环的cTnI,会“触发”机体免疫系统的识别和应答,从而产生抗cTnI自身抗体(cardiotroponinIantibody,cTnIAAb)。心肌细胞损伤后释放的心肌肌钙蛋白I(cTnI)会诱导机体免疫系统产生抗cTnI自身抗体(cTnIAAb)。
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cTnI检测试剂稳定性肌钙蛋白I自身抗体cTnI多肽链的两端易被蛋白酶水解,而位于肽链中心区域第30~位氨基酸区域与cTnC形成复合物而较为稳定。理论上来说,针对抗原性最强的氨基端和羧基端抗原表位设计检测抗体会达到最佳检测效果,但因肽链两端易被蛋白酶水解,相比之下,位于cTnI多肽链中心区域的氨基酸残基受cTnC的保护较为稳定,针对该区域设计的检测抗体或捕获抗体,可以有效解决cTnI分子两端氨基酸残基易降解而影响cTnI检测的问题。因此,目前大部分商业化cTnI检测系统都针对中心稳定区域设计检测抗体。
蛋白降解--sitesofproteolysis
自身抗体--Autoantibodies
自身抗体可特异性封闭cTnI多肽链的第30~位中心区域氨基酸残基的抗原位点,与检测试剂中的cTnI检测抗体竞争性结合cTnI。自身抗体与检测抗体竞争抗原表面结合位点,使肌钙蛋白I在检测中“隐形”,导致检测结果低于实际值,甚至假阴性。
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肌钙蛋白I自身抗体导致cTnI检测“假阴性”
从上文可知,目前大部分商业化cTnI检测系统都针对中心稳定区域设计检测抗体(30-),而自身抗体可特异性封闭cTnI多肽链的第30~位中心区域氨基酸残基的抗原位点,就造成了自身抗体与检测抗体竞争抗原表面结合位点,从而使肌钙蛋白I在检测中“隐形”,导致检测结果低于实际值,甚至“假阴性”。
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“肌钙蛋白I自身抗体”出现的几率
通过查询文献可知:1、在无心脏基础疾病的人群,肌钙蛋白自身抗体检出率在5%左右;2、有心脏疾病(包括心肌炎,心肌梗死)的患者初诊时肌钙蛋白自身抗体的检出率大概在9-16%之间;3、后续的跟踪过程或再梗死的患者,自身抗体的检出率进一步提高,可以达到21%以上;而且自身抗体的浓度大大提高。
4、心肌炎患者8.3%有肌钙蛋白自身抗体;
由此可见,在临床cTnI测定时,不仅要重视患者心肌梗死发生早期cTnI自身抗体对cTnI检测系统的负性干扰,还要